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快速革兰氏染色实验报告

 

一、实验器材及试剂

1、 实验器材

名称

厂家

型号

脱水机

上海徕卡仪器有限公司

ASP300S

包埋机

上海徕卡仪器有限公司

HistoCore Arcadia H

病理切片机

上海徕卡仪器有限公司

RM2235

冻台

江丰生物科技有限公司

KF-EMC-100

组织摊片机

江丰生物科技有限公司

KF-WS-100

烤箱

山东博科科学仪器有限公司

BJPX-HGZ75

载玻片

CITOGLAS


2、 主要实验试剂

试剂名称

厂家

货号

二甲苯

国药集团化学试剂有限公司

10023418

革兰氏染液套装

Servicebio

G1065

中性树胶

国药集团化学试剂有限公司

10004160

二、实验步骤

1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min,自来水洗。

2、革兰氏染色:切片滴加革兰氏染液A滴染10s-30s,水洗,甩干;滴加革兰氏染液B1min,水洗,甩干;巴氏吸管吸取革兰氏染液C从载玻片磨砂面一端冲洗组织进行分化,至切片流下的革兰氏染液C呈无色即可,水洗,甩干;将切片浸革兰氏染液D溶液1s水洗,镜检,烤箱烤干。

3、脱水:将烤干的切片快速入三缸无水乙醇快速脱水,依次1s、3s、5s。

4、透明封片:切片放入干净的二甲苯5min透明,中性树胶封片。

5、显微镜镜检,图像采集分析。

三、结果判读:

革兰氏阳性菌呈紫色,革兰氏阴性菌呈红色。

四、注意事项:

1、染色过程中的革兰氏染液C分化是关键步骤,需注意分化程度。

2、尽量不要重复染色,分化液在脱去片子颜色的同时也改变了细胞壁的通透性,影响了最后结果的准确性。

3、冬季气温较低时,染色时间可适当延长。

 

仅供科研用途,不可用于临床诊断!