一、实验器材及试剂

1、 实验器材

2、 主要实验试剂

二、组织切片制备

按照病理组织取材固定，OCT包埋，冰冻切片，等实验的SOP制备相应的组织切片。

三、染色步骤

1、冰冻切片固定：将冰冻切片从-20°冰箱取出恢复至室温，用组织固定液固定15min，自来水洗，晾干。

2、油红染色：6份饱和油红O染液与4份蒸馏水充分混合均匀，4℃静置过夜，第二天用定性滤纸过滤一次，在4℃放置24h在过滤第二次，得到油红O工作液。切片入油红染液浸染8-10min (加盖避光)。

3、背景分化：取出切片，停留3s后依次浸入两缸60%异丙醇分化，各3s、5s。切片依次浸入2缸纯水中浸洗，各10s。

4、苏木素染色：取出切片，停留3s后浸入苏木素复染3-5min，3缸纯水浸洗，各5s、10s、30s。分化液分化2-8s，2缸蒸馏水洗各10s，返蓝液返蓝1s，将切片轻轻浸入2缸自来水中浸洗，各5s、10s，镜检染色效果。

5、封片：甘油明胶封片剂封片。

6、显微镜镜检，图像采集分析。

四、结果判读：

脂滴呈橘红色至鲜红色，细胞核蓝色。

五、注意事项：

1、如果是新鲜组织冰冻切片，需要先固定再染色；如果组织是固定以后冰冻切片，可以将

切片晾干以后，直接染色。

2、整个操作过程中注意动作轻缓，不宜动作太大，以免脂肪丢失或者移位。

3、染色结果不能长期保存，封片后应尽快观察及拍照。

4、甘油明胶常温下为凝固状，一般60℃烤箱中保存。封片后如有气泡不能按压玻片也不宜

强行扯下盖玻片，玻片可入温水中，让盖玻片自行脱落，然后重新封片，以防脂肪移位。

仅供科研用途，不可用于临床诊断！