一、实验器材及试剂

1、 实验器材

2、 主要实验试剂

二、组织切片及爬片制备

按照病理组织取材固定，包埋，石蜡切片，冰冻切片，细胞爬片等实验的SOP制备相应的组织切片。

三、染色步骤

1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入环保型脱蜡液Ⅰ 20min—环保型脱蜡液Ⅱ 20min—无水乙醇Ⅰ 5min—无水乙醇Ⅱ 5min—75%酒精5min，自来水洗。

冰冻切片复温固定：将冰冻切片从-20°冰箱取出恢复至室温，用组织固定液固定15min后，流水冲洗。

细胞爬片固定：弃培养基，PBS洗3次，每次5min，加组织固定液固定15min后，蒸馏水洗。

2、阿利新蓝染色：切片入阿利新蓝染液中染色10-15min，自来水洗。1ml阿利新蓝染液加入细胞培养板孔内染色15min，蒸馏水洗。

3、染核：核固红染液浸染3min，自来水洗。1ml核固红染液加入细胞培养板孔内染色3min，蒸馏水洗。

4、脱水封片：切片依次放入无水乙醇I 5min ，无水乙醇II 5min，无水乙醇Ⅲ 5min ，二甲苯Ⅰ5min，二甲苯Ⅱ 5min透明，中性树胶封片。在细胞培养板内依次加入无水乙醇I 5min后弃去；无水乙醇II 5min后弃去；无水乙醇Ⅲ 5min后弃去，将爬有细胞的盖玻片取出晾干，将有细胞的一面朝下用中性树胶封固在载玻片上。

5、显微镜镜检，图像采集分析。

四、结果判读

1、软骨细胞、酸性粘液物质呈蓝色，细胞核呈红色。

仅供科研用途，不可用于临床诊断！