一、实验器材及试剂

1、 实验器材

2、 主要实验试剂

二、组织切片制备

按照取材固定，包埋，石蜡切片，冰冻切片，等实验的SOP制备相应的组织切片。

三、染色步骤

黑色素工作液配制：取黑色素染液A10ml，逐滴加入浓氨水至产生沉淀后，继续滴加氨水，边滴边摇动，使产生的沉淀又复溶解，溶液变清。再滴入黑色素染液A数滴使溶液呈轻微混浊，最后加入20ml的蒸馏水，过滤后即可使用。

1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-

无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min，自来水洗，蒸馏水浸洗3-5遍。

2、工作液孵育：切片浸入黑色素工作液并加盖，置于4℃避光反应12-18h，蒸馏水洗3遍。

3、复染VG：黑色素染液B 9ml加入黑色素染液C 1ml（配制后可反复使用多次）混合成VG染液（按比例配制用多少配多少），染1min，快速水洗，无水乙醇三缸快速脱水3s、5s、30s。

4、透明封片：两缸干净的二甲苯透明各20s、5min（二甲苯专用不与其他二甲苯共用），中性树胶湿封；

5、显微镜镜检，图像采集分析。

三、结果判读：

黑色素、亲银细胞胞质呈黑色，胶原纤维呈红色，肌纤维和红细胞呈黄色。

四、注意事项：

1、配工作液和孵育时用的容器，在用之前必须用蒸馏水清洗干净，否则易出现杂质和沉淀。

仅供科研用途，不可用于临床诊断！