髓鞘LFB染色实验报告

一、实验器材及试剂

1、 实验器材

2、 主要实验试剂

二、实验步骤

1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ 20min-二甲苯Ⅱ 20min-无水乙醇Ⅰ 5min-无水乙醇Ⅱ 5min-75%酒精5min，自来水洗。

2、 髓鞘染色：髓鞘染液A置于60℃ 烤箱预热30min，切片入髓鞘染液A加膜加盖浸染1h，取出切片快速自来水洗。

3、背景分化：切片浸入髓鞘染液B中稍分化2s（趁热），直接浸入髓鞘染液C分化

15s，水洗终止分化，镜检，反复分化水洗和镜检，至髓鞘呈蓝色背景近无色即可;

4、复染伊红：切片入65度烤箱烤干（约30min至玻片干燥）拿出，冷却后进入95%乙醇后后复染伊红。

5、脱水封片：切片依次放入无水乙醇I 5min -无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min -二甲苯Ⅰ5min -二甲苯Ⅱ5min透明，中性树胶封片。

6、显微镜镜检，图像采集分析。

三、结果判读：

神经髓鞘呈蓝色，其他成分呈近乎无色。

四、注意事项：

1、将切片染完后，不能长时间放在水中清洗，颜色会褪掉。

2、注意交替分化时程度的把握，分过过度，髓鞘的颜色会褪掉，分化不足，则界限不清楚；

3、若分化过度，可以将切片至于染液中重染。

仅供科研用途，不可用于临床诊断！