一、实验器材及试剂
1、 实验器材
名称 | 厂家 | 型号 |
脱水机 | 上海徕卡仪器有限公司 | ASP300S |
包埋机 | 上海徕卡仪器有限公司 | HistoCore Arcadia H |
病理切片机 | 上海徕卡仪器有限公司 | RM2016 |
冻台 | 江丰生物科技有限公司 | KF-EMC-100 |
组织摊片机 | 江丰生物科技有限公司 | KF-WS-100 |
烤箱 | 天津市莱玻瑞仪器设备有限公司 | GFL-230 |
粘附载玻片 | CITOGLAS |
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盖玻片 | 江苏世泰实验器材有限公司 | 10212432C |
2、 主要实验试剂
试剂名称 | 厂家 | 货号 |
无水乙醇 | 国药集团化学试剂有限公司 | 100092683 |
二甲苯 | 国药集团化学试剂有限公司 | 10023418 |
通用型组织固定液 | 广州维格斯生物科技有限公司 |
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尼氏染液 | 自产 |
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冰醋酸 | 国药集团化学试剂有限公司 | 10000218 |
中性树胶 | 国药集团化学试剂有限公司 | 10004160 |
二、组织切片制备
按照取材固定，包埋，石蜡切片，冰冻切片，等实验的SOP制备相应的组织切片。
三、染色步骤
1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入环保型脱蜡液Ⅰ 20min—环保型脱蜡液Ⅱ 20min—无水乙醇Ⅰ 5min—无水乙醇Ⅱ 5min—75%酒精5min，自来水洗。
冰冻切片复温固定：将冰冻切片从-20°冰箱取出恢复至室温，用组织固定液固定15min后，流水冲洗。
2、尼氏染色：
组织切片入染液2-5min，水洗，0.1%的冰醋酸稍分化，自来水洗终止反应，显微镜下控制分化程度，自来水洗后，将切片置于烤箱烤干。
3、透明封片：切片入干净的二甲苯透明10min，中性树胶封片。
4、显微镜镜检，图像采集分析。
四、结果判读：
神经元内的尼氏小体呈深蓝色颗粒，细胞核呈淡蓝色，背景淡蓝色
五、注意事项：
1、染完后的切片不能长时间放在水里，会褪色。
2、组织一定要完全烤干后再封片，避免组织残留小水珠。
仅供科研用途，不可用于临床诊断！
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