一、实验器材及试剂
1、 实验器材
名称 | 厂家 | 型号 |
脱水机 | 上海徕卡仪器有限公司 | ASP300S |
包埋机 | 上海徕卡仪器有限公司 | HistoCore Arcadia H |
病理切片机 | 上海徕卡仪器有限公司 | RM2016 |
冻台 | 江丰生物科技有限公司 | KF-EMC-100 |
组织摊片机 | 江丰生物科技有限公司 | KF-WS-100 |
烤箱 | 天津市莱玻瑞仪器设备有限公司 | GFL-230 |
粘附载玻片 | CITOGLAS |
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盖玻片 | 江苏世泰实验器材有限公司 | 10212432C |
2、 主要实验试剂
试剂名称 | 厂家 | 货号 |
无水乙醇 | 国药集团化学试剂有限公司 | 100092683 |
二甲苯 | 国药集团化学试剂有限公司 | 10023418 |
PAS染液 | 自产 |
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苏木素 | 自产 |
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中性树胶 | 国药集团化学试剂有限公司 | 10004160 |
二、组织切片制备
按照病理组织取材固定,包埋,石蜡切片,冰冻切片,等实验的SOP制备相应的组织切片。
三、染色步骤
1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入环保型脱蜡液Ⅰ 20min—环保型脱蜡液Ⅱ 20min—无水乙醇Ⅰ 5min—无水乙醇Ⅱ 5min—75%酒精5min,自来水洗。
冰冻切片复温固定:将冰冻切片从-20°冰箱取出恢复至室温,用组织固定液固定15min后,流水冲洗。
2、切片入PAS染色液B中染色10-15min,自来水洗,蒸馏水洗两遍;
3、切片入PAS染色液A浸染25-30min,避光,流水冲洗5min;
4、切片入PAS染色液C染30S,自来水洗,盐酸水溶液分化,自来水洗,氨水返蓝,流水冲洗。
5、脱水封片:切片依次放入无水乙醇I 5min -无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min -二甲苯5min-二甲苯Ⅱ5min透明,中性树胶封片。
6、显微镜镜检,图像采集分析。
四、结果判读:
糖原、杯状细胞、真菌、植物淀粉粒和细胞壁呈紫红色,细胞核呈浅蓝色。
五、注意事项:
1、PAS染色液B要经常更换,避免影响染色效果;
2、PAS染色液A染色时要避光。
仅供科研用途,不可用于临床诊断!