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PAS实验报告

一、实验器材及试剂

1、 实验器材

名称

厂家

型号

脱水机

上海徕卡仪器有限公司

ASP300S

包埋机

上海徕卡仪器有限公司

HistoCore Arcadia H

病理切片机

上海徕卡仪器有限公司

RM2016

冻台

江丰生物科技有限公司

KF-EMC-100

组织摊片机

江丰生物科技有限公司

KF-WS-100

烤箱

天津市莱玻瑞仪器设备有限公司

GFL-230

粘附载玻片

CITOGLAS


盖玻片

江苏世泰实验器材有限公司

10212432C

2、 主要实验试剂

试剂名称

厂家

货号

无水乙醇

国药集团化学试剂有限公司

100092683

二甲苯

国药集团化学试剂有限公司

10023418

PAS染液

自产


苏木素

自产


中性树胶

国药集团化学试剂有限公司

10004160

二、组织切片制备

按照病理组织取材固定,包埋,石蜡切片,冰冻切片,等实验的SOP制备相应的组织切片。

三、染色步骤

1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入环保型脱蜡液Ⅰ 20min—环保型脱蜡液Ⅱ 20min—无水乙醇Ⅰ 5min—无水乙醇Ⅱ 5min—75%酒精5min,自来水洗。

冰冻切片复温固定:将冰冻切片从-20°冰箱取出恢复至室温,用组织固定液固定15min后,流水冲洗。

2、切片入PAS染色液B中染色10-15min,自来水洗,蒸馏水洗两遍;

3、切片入PAS染色液A浸染25-30min,避光,流水冲洗5min;

4、切片入PAS染色液C染30S,自来水洗,盐酸水溶液分化,自来水洗,氨水返蓝,流水冲洗。

5、脱水封片:切片依次放入无水乙醇I 5min -无水乙醇II 5min-无水乙醇Ⅲ5min -二甲苯5min-二甲苯Ⅱ5min透明,中性树胶封片。

6、显微镜镜检,图像采集分析。

四、结果判读:

糖原、杯状细胞、真菌、植物淀粉粒和细胞壁呈紫红色,细胞核呈浅蓝色。

五、注意事项:

1、PAS染色液B要经常更换,避免影响染色效果;

2、PAS染色液A染色时要避光。

 

仅供科研用途,不可用于临床诊断!