一、实验器材及试剂
1、 实验器材
名称 | 厂家 | 型号 |
脱水机 | 上海徕卡仪器有限公司 | ASP300S |
包埋机 | 上海徕卡仪器有限公司 | HistoCore Arcadia H |
病理切片机 | 上海徕卡仪器有限公司 | RM2235 |
冻台 | 江丰生物科技有限公司 | KF-EMC-100 |
组织摊片机 | 江丰生物科技有限公司 | KF-WS-100 |
烤箱 | 山东博科科学仪器有限公司 | BJPX-HGZ75 |
载玻片 | CITOGLAS |
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2、 主要实验试剂
试剂名称 | 厂家 | 货号 |
无水乙醇 | 国药集团化学试剂有限公司 | 100092683 |
二甲苯 | 国药集团化学试剂有限公司 | 10023418 |
正丁醇 | 国药集团化学试剂有限公司 | 100052190 |
苏木素-伊红（H&E）高清恒染试剂盒 | 珠海宏兹嘉华科技有限公司 | HJ-H0750-4 |
中性树胶 | 国药集团化学试剂有限公司 | 10004160 |
二、组织切片制备
按照取材固定，包埋，石蜡切片，冰冻切片，等实验的SOP制备相应的组织切片。
三、染色步骤
1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入环保型脱蜡液Ⅰ 20min—环保型脱蜡液Ⅱ 20min—无水乙醇Ⅰ 5min—无水乙醇Ⅱ 5min—75%酒精5min，自来水洗。
冰冻切片复温固定：将冰冻切片从-20°冰箱取出恢复至室温，用组织固定液固定15min后，流水冲洗。
2、预处理：切片入高清恒染预处理液处理1min。
3、苏木素染色：切片入苏木素染液染3-5min，自来水洗，分化液分化，自来水洗，返蓝液返蓝，流水冲洗。
4、伊红染色：切片入95%的酒精脱水1min，入伊红染液中染色15s。
5、脱水封片：切片依次放入无水乙醇I 2min -无水乙醇II 2min-无水乙醇Ⅲ2min -正丁醇I 2min-正丁醇II 2min-二甲Ⅰ2min- 二甲苯Ⅱ2min透明，中性树胶封片。
6、显微镜镜检，图像采集分析。
四、结果判读：
细胞核呈蓝色，细胞质呈红色。
五、注意事项：
1、注意细胞核的分化程度；
2、注意苏木素和伊红的效价，及时更换染液。
仅供科研用途，不可用于临床诊断！
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