硝酸脱钙液是最常用的脱钙剂，用硝酸作脱钙液的缺点是形成亚硝酸而使溶液呈黄色，产生染色即迅速影响脱钙速度，且组织的黄染会妨碍随后的染色反应。在硝酸内加入0.1%尿素可以防止变黄而使之无色。
（1）甲醛-硝酸液（Clayden液）
配方：
甲醛溶液 5ml
硝酸(比重1.14） 7.5-15ml
蒸馏水 加至 100ml
此处方中甲醛可部分地抑制硝酸的浸软作用，这既具有脱钙作用，又具有固定作用，硝酸脱钙迅速，组织不膨胀，掌握好脱钙时间可直接脱水，不影响染色效果。但最好先洗去硝酸。横切人肋骨（5mm)用含7.5%硝酸液于1-2d内脱钙。
（2）硝酸水溶液
配方：
硝酸（用0.1%尿素稳定） 5-10ml
蒸馏水 加至 100ml
此液用作常规脱钙剂，作用迅速，对组织不膨胀，对细胞的保存和染色比前者更好，能适用多种染色技术，但每日需要更换新鲜溶液，最好早、晚各一次，一般1-3d完成。横切人肋骨（5mm)在12-24h内脱钙。
三、脱钙步骤
1.取材
骨组织固定于10%甲醛溶液24h后再锯取厚度约0.5cm骨片。
2. 固定
再以10%甲醛溶液固定2d。
3. 将组织置于脱钙剂中，每日更换新鲜液、直至组织软化为止。
4. 流水冲洗24h(除酸）。
5. 进行常规脱水，透明，浸蜡，切片。
四、鉴定脱钙是否彻底
1.最常用的是最简单的方法---针刺
如果很容易被刺透，而且不感到阻力时，说明组织基本上脱钙完全，否则应继续脱钙。靠组织的柔软性测验脱钙作用靠不住，而且这种插入一根针以察觉钙沉淀的方法会造成组织损伤。
五、酸的中和
脱钙后水洗24h,目的是除去组织中经无机盐浸渍后过多的酸，以免影响染色。在冲洗前应将组织用一种碱处理以使之脱酸呈中性，可用5%硫酸钾或硫酸钠处理过夜。组织直接转移到稀乙醇（70%）内过12-18h换液2次，再继续脱水，经无水乙醇，氯仿透明，石蜡包埋，切片，整个过程其酸已全部除去，在多数情况下不仅不膨胀且对染色
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